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新品 I Pfanstiehl 重磅推出注射級(jí)琥珀酸Succinic Acid (S-142)

眾所周知，在抗體和蛋白質(zhì)藥物的配方開(kāi)發(fā)過(guò)程中，緩沖液可以幫助實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)離其等電點(diǎn)（pI）的pH值目標(biāo)(通常低于pI). 緩沖液具有的強(qiáng)大緩沖能力，可以在加工、儲(chǔ)存和給藥過(guò)程中為抗體蛋白分子提供最佳的物理和化學(xué)穩(wěn)定性。由于大多數(shù)傳統(tǒng)的單克隆抗體的pI在5.9至9.0之間，因此pH值在4.5至6.5之間是單克隆抗體制劑被高度期望的范圍，以平衡物理和化學(xué)降解風(fēng)險(xiǎn)。 此外，IgG4的pI通常在6至7.1之間，那么pH 5.0則是目標(biāo)制劑的理想pH值，因?yàn)樗軌蛲ㄟ^(guò)靜電排斥和降低較高溫度下脫酰胺的風(fēng)險(xiǎn)，以達(dá)到穩(wěn)定分子的目的。 盡管在液體和凍干產(chǎn)品中，組氨酸在pH 5.5至6.5的范圍內(nèi)都占據(jù)主導(dǎo)地位，但如果目標(biāo)pH值在4.5至5.5之間，我們依然還有另外三種緩沖液可選，即醋酸鹽、檸檬酸鹽和琥珀酸鹽。這些緩沖物質(zhì)存在某些固有的挑戰(zhàn)，阻礙了它們?cè)陟o脈和皮下給藥以及液體和凍干劑型方面的廣泛使用。而組氨酸的pKa值為6，在pH<5.5時(shí)緩沖性較差，因此在4.5至5.5的pH范圍內(nèi)應(yīng)用有限。雖然醋酸鹽在此范圍內(nèi)具有良好的緩沖能力，但其易揮發(fā)和冷凍干燥過(guò)程中溶劑的過(guò)度損失是其應(yīng)用相關(guān)的潛在挑戰(zhàn)。檸檬酸鹽緩沖制劑在皮下應(yīng)用中使用有限，原因是在皮下注射期間存在壞死的風(fēng)險(xiǎn)。琥珀酸鹽在pH4.5至5.5之間提供了強(qiáng)大的緩沖能力，但由于琥珀酸鹽結(jié)晶影響產(chǎn)品穩(wěn)定性而導(dǎo)致pH值劇烈波動(dòng)的風(fēng)險(xiǎn)，通常避免其用于冷凍或凍干的應(yīng)用。以下表格總結(jié)了在注射制劑中使用這四種緩沖液的局限性[1]。在比較這些緩沖液系統(tǒng)時(shí)，琥珀酸鹽具有顯著的內(nèi)在優(yōu)勢(shì)。首先，其pKa值為4.2和5.6，琥珀酸鹽緩沖液在pH4.4和5.8之間提供了優(yōu)異的緩沖能力。其次，它不像醋酸易揮發(fā)，因此能夠用于凍干產(chǎn)品。最后，琥珀酸鹽已被證明具有體內(nèi)給藥后可接受的耐受性。然后這些優(yōu)點(diǎn)可能由于琥珀酸鹽在冷凍或冷凍干燥過(guò)程中易結(jié)晶，從而導(dǎo)致pH值波動(dòng)以及這些pH值波動(dòng)影響產(chǎn)品穩(wěn)定性的風(fēng)險(xiǎn)而忽視掉了。 Sundaramurthi et al. [2]在他們的工作中強(qiáng)調(diào)了琥珀酸鹽由于凍干而引起其pH值變化的程度。在他們的研究中，將50至200mM濃度的琥珀酸緩沖液從0°C冷卻至25°C，線(xiàn)性冷凍速率為0.5°C/min，使用低溫pH電極表征冷凍對(duì)pH的影響。他們的研究表明，pH值波動(dòng)的大小和方向性取決于起始琥珀酸濃度，起始溶液pH值和冷凍速率。并且這種波動(dòng)可以通過(guò)蛋白質(zhì)和糖等共溶質(zhì)的存在而被減弱。琥珀酸鹽在冷凍過(guò)程中的結(jié)晶被確定為其pH值變化的根本原因。 Anvay Ukidve et al.[1] 在他們的工作中評(píng)估了使用琥珀酸作為用于pH 4.5至5.5之間的單克隆抗體制劑的緩沖液在冷凍、冷凍儲(chǔ)存和凍干中的應(yīng)用。他們的研究中，發(fā)現(xiàn)25mM琥珀酸鹽可以作為達(dá)到pH5.0的傳統(tǒng)單克隆抗體制劑緩沖液；同時(shí)確定琥珀酸單鈉的選擇性結(jié)晶為其pH值變化的根本原因。此外，他們的工作證實(shí)通過(guò)加入2%w/v的蔗糖可以減輕琥珀酸單鈉的結(jié)晶，從而極大緩解pH值的波動(dòng)，使其可以用于mAb藥物制劑，并在加速動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定性測(cè)試中顯示出可接受的質(zhì)量屬性。 Pfanstiehl秉承一貫高品質(zhì)理念，繼早已上市的琥珀酸鈉D-161后，再次重磅推出注射級(jí)別琥珀酸Succinic acid（植物源）, 具有高純度，超低內(nèi)毒素，超低金屬殘留的特點(diǎn)，單獨(dú)檢測(cè)29種金屬離子，并且新增DNA，RNA，DNA酶，RNA酶和脂肪酶，亞硝酸鹽等多項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)的檢測(cè)，符合多國(guó)藥典規(guī)定（NF, EP, BP, JPE, ChP），可用于生物治療性藥物和疫苗的生產(chǎn)。 產(chǎn)品信息： ·產(chǎn)品名稱(chēng):Succinic Acid, High Purity, Low Endotoxin, Low Metals, NF, EP, BP, JPE, ChP (S-142) ·中文名稱(chēng)：琥珀酸 ·分子式：C4H6O4 ·分子量：118.09 g / mol ·CAS號(hào)：110-15-6 ·產(chǎn)品貨號(hào)：S-142 產(chǎn)品特點(diǎn)： ·高純度，超低內(nèi)毒素，超低微生物含量，超低金屬雜質(zhì)殘留 ·質(zhì)量指標(biāo)新增DNA，RNA，DNA酶，RNA酶，脂肪酶和亞硝酸鹽檢測(cè) ·符合多國(guó)藥典：NF, EP, BP, JPE, ChP ·符合ICH Q3D標(biāo)準(zhǔn) ·符合GMP標(biāo)準(zhǔn) ·美國(guó)DMF和中國(guó)CDE藥用輔料登記工作進(jìn)行中 產(chǎn)品應(yīng)用： ·緩沖液 如果您對(duì)Pfanstiehl的注射級(jí)別Succinic Acid S-142感興趣，歡迎聯(lián)系Pfanstiehl 中國(guó)區(qū)代理北京西美杰科技有限公司獲得如下詳細(xì)的產(chǎn)品概況說(shuō)明文件和測(cè)試樣品。 [1]Anvay Ukidvea,1 , Kelvin B. Remberta,1,2 , Ragaleena Vanipentaa , Patrick Doriona,2 , Pierre Lafarguetteb , Timothy McCoya,2 , Atul Salujaa , Raj Suryanarayananc , Sanket Patkea, Succinate buffer in biologics Products；real world formulation considerations, processing risks and mitigation strategies. Pharmaceutics, Drug Delivery and Pharmaceutical Technology. 2022. [2]Sundaramurthi P, Shalaev E, Suryanarayanan R. Calorimetric and diffractometric evidence for the sequential crystallization of buffer components and the consequential pH swing in frozen solutions. J Phys Chem B. 2010;114(14):4915–4923. Pfanstiehl Inc.其他產(chǎn)品系列如下，如需測(cè)試請(qǐng)點(diǎn)擊這里獲取100g免費(fèi)試用裝。 北京西美杰科技有限公司為Pfanstiehl中國(guó)代理，為客戶(hù)提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎撥打西美杰客服電話(huà)400-050-4006或者登陸網(wǎng)站wap.cijlm.cn了解更多信息 更多>

新品上市 | ?西美杰代理Jena Bioscience高濃度標(biāo)記核苷酸

標(biāo)記核苷酸是生命科學(xué)研究的一個(gè)關(guān)鍵要素，是分子生物學(xué)檢測(cè)中檢測(cè)特定核酸序列的有效工具，它們具有生物活性，通常通過(guò)酶的作用而結(jié)合到 DNA 或 RNA 序列中進(jìn)行檢測(cè)和分析。Cy3, Cy5和生物素是生產(chǎn)非放射性DNA和RNA探針常用的標(biāo)記物之一，他們具有很好的酶促特性和可選擇性。西美杰代理的Jena Bioscience品牌現(xiàn)在能提供用于DNA和RNA非放射標(biāo)記的濃度為10mM的Cy3-，Cy5- 和濃度為5mM的Biotin- 標(biāo)記的核苷酸。品牌 品名 貨號(hào) 規(guī)格 Jena Bioscience UTP-Cy3 - high concentration NU-821-CY3-HC 10 µl(10 mM) Jena Bioscience UTP-Cy5 - high concentration NU-821-CY5-HC 10 µl(10 mM) Jena Bioscience Biotin-11-dATP - high concentration NU-1175-BIOX-HC 20 µl(5 mM) Jena Bioscience Biotin-11-dCTP - high concentration NU-809-BIOX-HC 500 µl(5 mM) 圖一: 用于RNA標(biāo)記的酶摻入熒光標(biāo)記核苷酸圖二: 用于DNA標(biāo)記的酶摻入生物素標(biāo)記核苷酸北京西美杰科技有限公司為Jena Bioscience中國(guó)代理，為客戶(hù)提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎撥打西美杰客服電話(huà)400-050-4006或者登陸網(wǎng)站wap.cijlm.cn了解更多信息。 更多>

星品推薦 | 安全低毒高質(zhì)量的新型MIDORIGreen核酸染料

核酸染料是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中不可或缺的試劑，其中溴化乙錠(EtBr)因其高靈敏度，長(zhǎng)期以來(lái)一直被用作核酸染色的標(biāo)準(zhǔn)染料。但是EtBr具有潛在的誘變和致癌作用，EtBr能與DNA嵌合，引起細(xì)胞突變，長(zhǎng)期接觸可能對(duì)人體健康產(chǎn)生負(fù)面影響。NIPPON GENETICS推出的新型MIDORIGreen系列核酸染料，是一種非致癌性和非致突變性的染料，無(wú)法穿透乳膠手套和細(xì)胞膜。同時(shí)致突變性試驗(yàn)（Ames試驗(yàn)）和細(xì)胞毒性試驗(yàn)均為陰性，因此是一種高安全度的核酸染料[1]。 紫外光與EtBr染色至今仍一起被用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中檢測(cè)核酸。然而紫外光譜會(huì)導(dǎo)致DNA樣品的修飾和降解，30秒的紫外線(xiàn)曝光足以大幅降低克隆效率。藍(lán)/綠LED在470 nm - 520 nm處發(fā)出安全可見(jiàn)光，這種光譜對(duì) DNA 沒(méi)有破壞性，與紫外光相比，DNA完整性和克隆/測(cè)序效率完全不受影響，即使在長(zhǎng)時(shí)間的光照下也是如此。MIDORIGreen系列核酸染料經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可在紫外光或藍(lán)/綠光激發(fā)時(shí)獲得更亮的信號(hào)，同時(shí)也兼容紫外光。 圖1：EtBr和MIDORIGreen吸收光譜對(duì)比 MIDORIGreen產(chǎn)品特點(diǎn) ? 出色的信號(hào)質(zhì)量 ? 用于凝膠內(nèi)染色和后染色的安全核酸染料 ? 溴化乙錠的安全替代品：非致癌無(wú)毒 ? 適用dsDNA、ssDNA或RNA染色 ? 膠染法和泡染法均可 MIDORIGreen Advance MIDORIGreen Advance靈敏度與EtBr相當(dāng)，可以直接添加到熔融的瓊脂糖中。同時(shí)兼容紫外線(xiàn)或藍(lán)/綠LED，因此無(wú)需更改原有的實(shí)驗(yàn)步驟。MIDORIGreen Advance的稀釋倍數(shù)可高達(dá)1：25000。100 mL瓊脂糖凝膠只需4μL至6μL，每1mL的染料可配置約17L至25L瓊脂糖凝膠。MIDORIGreen Direct MIDORIGreen Direct中已經(jīng)包含10X Loading Buffer，可以直接添加到核酸樣品中，無(wú)需將其或任何其他染料添加到凝膠基質(zhì)。相較于在凝膠中添加染料的染色方式，核酸的直接染色消除了背景染色，提供了完美的信噪比。1 mL的 MIDORIGreen Direct足夠提供1,000至2,000個(gè)樣品的染色。 MIDORIGreen Direct可以為下游提供更好的結(jié)果。 從瓊脂糖凝膠中分離核酸可以進(jìn)一步下游應(yīng)用，許多染料，如EtBr甚至SYBR? Green，由于其嵌入特性，都是強(qiáng)酶抑制劑。而MIDORI Green 染料與 DNA 骨架結(jié)合的方式能為下游應(yīng)用帶來(lái)更高的效率，包括克隆、測(cè)序、PCR等。[2]圖2：相較于EtBr，MIDORIGreen Direct轉(zhuǎn)化的E.coli菌落數(shù)增加，提高了轉(zhuǎn)換效率 MIDORIGreen Xtra MIDORIGreen Xtra是NIPPON GENETIC最新一代核酸染料，針對(duì)藍(lán)/綠LED和藍(lán)LED光源進(jìn)行了優(yōu)化，可以在瓊脂糖凝膠中產(chǎn)生強(qiáng)熒光信號(hào)。同時(shí)MIDORIGreen Xtra不會(huì)對(duì)瓊脂糖凝膠進(jìn)行染色，因而具有很低的背景噪音，從而獲得出色的信噪比。由于非常低的背景熒光，這使得識(shí)別少量 DNA 變得非常容易，因此MIDORIGreen Xtra具有超高靈敏度。圖3：使用MIDORI Green Xtra檢測(cè)的DNA條帶具有超高靈敏度（注：左圖使用藍(lán)色/綠色 LED 透射儀進(jìn)行檢測(cè)；右圖使用藍(lán)色LED透射儀進(jìn)行檢測(cè)。） MIDORIGreen easy MIDORIGreen easy具有與MIDORIGreen Xtra相同的出色信號(hào)質(zhì)量和低背景，擁有比EtBr更好的信號(hào)，MIDORIGreen easy的開(kāi)發(fā)是為了可以輕松替換SYBR&reg;safe，同時(shí)染色方案不需要改變。MIDORIGreen Easy的稀釋倍數(shù)可高達(dá)1：10000，100 mL瓊脂糖凝膠只需8μL至10μL。圖4：MIDORIGreen easy（左）與MIDORIGreen Xtra（右）使用藍(lán)/綠 LED 激發(fā)燈。 MIDORIGreen系列檢測(cè)光譜與靈敏度 產(chǎn)品 藍(lán)/綠LED 藍(lán)LED UV-Light 靈敏度 MIDORIGreen Advance √ √ ? + MIDORIGreen Direct √ √ ? + + MIDORIGreen Xtra √ √ ? + + + MIDORIGreen Easy √ √ √ + + 注: √表示兼容；?表示兼容但不推薦； MIDORIGreen核酸染料系列產(chǎn)品列表 貨號(hào) 品名 規(guī)格 MG04 MIDORIGreen Advance 1 ml (25.000x -可染色25L凝膠) MG06 MIDORIGreen Direct (含loading buffer) 1 ml (10x conc. -可直接添加樣品) MG10 MIDORIGreen Xtra 1 ml (25.000x -可染色25L凝膠) MG12 MIDORIGreen Easy 0.4 ml (10.000x -可染色4L凝膠) NIPPON Genetics是一家專(zhuān)注于分子和細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的尖端產(chǎn)品的公司，已通過(guò)DIN EN ISO 9001：2015質(zhì)量管理體系認(rèn)證。北京西美杰科技有限公司是NIPPON Genetics中國(guó)區(qū)代理，如果您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣，歡迎致電北京西美杰客服熱線(xiàn)400-050-4006或登錄網(wǎng)站wap.cijlm.cn了解更多產(chǎn)品信息。 更多>

Cygnus新品上市 | Protein L殘留檢測(cè)試劑盒

Cygnus新推出的Protein L Mix-N-Go? ELISA試劑盒采用了特有的一步法樣本處理方法，可準(zhǔn)確評(píng)估抗體片段藥物中殘留的蛋白L雜質(zhì)，縮短檢測(cè)時(shí)間，提高蛋白L檢測(cè)結(jié)果的可靠性。 更多>

白蛋白與白蛋白融合蛋白的親和層析純化

人血清白蛋白 人血清白蛋白（Human Serum Albumin，HSA）是血漿中含量最豐富的蛋白質(zhì)，占血漿蛋白的40-60%，半衰期長(zhǎng)達(dá)20天，具有重要的生理學(xué)和藥理學(xué)功能，能維持血液正常的滲透壓，穩(wěn)定電解質(zhì)和酸堿平衡，參與物質(zhì)運(yùn)輸。在臨床上，人血清白蛋白一直被譽(yù)為“黃金救命藥”，主要用于手術(shù)輸血和危重病人的補(bǔ)液、治療創(chuàng)傷或燒傷引起的休克、治療低白蛋白血癥等。 人血白蛋白（圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)） 人血清白蛋白在臨床上使用量很大，通常每劑量高達(dá)10g。而市售的治療性人血白蛋白多數(shù)來(lái)源于血漿，經(jīng)冷乙醇沉淀、柱層析、過(guò)濾等多種技術(shù)結(jié)合的方式純化獲得。由于人血漿來(lái)源有限、動(dòng)物源性污染風(fēng)險(xiǎn)高，近年來(lái)，全球范圍內(nèi)很多公司和實(shí)驗(yàn)室都在嘗試采用基因工程的手段來(lái)制備重組人血清白蛋白（Recombinant Human Serum Albumin，rHSA），2024年4月8日，通化安睿特生物制藥股份有限公司自主研發(fā)的重組人白蛋白注射液，完成在俄羅斯的注冊(cè)，成功獲得歐亞經(jīng)濟(jì)聯(lián)盟-俄羅斯聯(lián)邦衛(wèi)生部批準(zhǔn)上市，成為全球首個(gè)獲批上市的治療性重組人血清白蛋白產(chǎn)品，極大推動(dòng)了全球生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。 人血清白蛋白由585個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成，無(wú)糖基化，分子量約66kDa，親水性較高，分子中包含3個(gè)結(jié)構(gòu)域（Domains）和35個(gè)半胱氨酸殘基，組成17對(duì)分子內(nèi)二硫鍵和一個(gè)游離的半胱氨酸殘基，確保了其結(jié)構(gòu)域的剛性特點(diǎn)。Mimetic Blue&reg; SA HL P6XL層析填料 Mimetic Blue&reg; SA HL P6XL是Astrea Bioseparations公司推出的白蛋白親和層析填料，填料基架是粒徑均一的交聯(lián)瓊脂糖，配基是合成的蒽醌化合物，可以特異性結(jié)合白蛋白，用于血漿來(lái)源的白蛋白或重組白蛋白的捕獲。Mimetic Blue&reg; SA HL P6XL的性能參數(shù)如下表所示。 Mimetic Blue&reg; SA HL P6XL親和層析填料具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性，如圖1所示，將填料浸泡于不同pH的試劑中，測(cè)試3個(gè)月，在pH 3-13的范圍內(nèi)，填料無(wú)明顯配基脫落，結(jié)合效果良好，除此之外，Mimetic Blue&reg; SA HL P6XL親和層析填料與常見(jiàn)的變性劑如尿素和鹽酸胍、表面活性劑、還原劑等兼容性良好?；谄淞己玫幕瘜W(xué)穩(wěn)定性，Mimetic Blue&reg; SA HL P6XL親和層析填料可高效重復(fù)使用，在超過(guò)100個(gè)批次（>100 cycles）重復(fù)使用后，仍保持卓越的結(jié)合載量和純化效果。 圖1. Mimetic Blue&reg; SA HL P6XL的pH耐受性測(cè)試 在一項(xiàng)測(cè)試中，研究人員將未經(jīng)處理的人源性血清直接上樣到裝有Mimetic Blue&reg; SA HL P6XL填料的層析柱中，層析工藝參數(shù)如下表所示： 由圖2的層析圖譜和圖3的SDS-PAGE檢測(cè)結(jié)果可以看出，Mimetic Blue&reg; SA HL P6XL可以選擇性的結(jié)合人血清中的白蛋白，其他蛋白隨流穿液離開(kāi)層析柱，洗脫液中白蛋白純度高達(dá)96%，回收率高于90%。 圖2. Mimetic Blue&reg; SA HL P6XL捕獲血漿來(lái)源白蛋白的層析圖譜 圖3. SDS-PAGE檢測(cè)結(jié)果（Lane 1: molecular weight marker; Lane 2: load; Lane 3: flow through; Lane 4: elution）Mimetic Blue&reg; SA HL P6XL訂購(gòu)信息 散裝填料 預(yù)裝柱 白蛋白融合蛋白白蛋白融合蛋白示意圖（圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)）白蛋白融合蛋白（rHSA Fusion Proteins）是將目的蛋白與白蛋白進(jìn)行融合表達(dá)的蛋白質(zhì)，可延長(zhǎng)目的蛋白在體內(nèi)的半衰期，在生物醫(yī)藥領(lǐng)域中具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。早在1992年，歐洲科學(xué)家就嘗試將白蛋白和CD4蛋白基因融合后在酵母體系中表達(dá)，用于HIV的治療。2014年，GSK公司推出一種GLP-1受體激動(dòng)劑阿必魯肽（Albiglutide），用于治療2型糖尿病，該藥物是將兩個(gè)GLP-1串聯(lián)后與rHSA融合，具有長(zhǎng)效性，僅需每1-2周注射一次，可有效幫助患者管理其血糖水平。2016年，CSL Bering公司Idelvion經(jīng)FDA批準(zhǔn)上市，該產(chǎn)品是凝血因子IX和rHSA的融合蛋白，在血液中半衰期更長(zhǎng)，用于治療B型血友病。此外，還有很多其他類(lèi)型的白蛋白融合蛋白正處于臨床試驗(yàn)階段，例如，生長(zhǎng)因子-rHSA融合蛋白、白介素2-rHSA融合蛋白、抗體片段-rHSA融合蛋白（如scFv-rHSA融合蛋白）、干擾素α-2b-rHSA融合蛋白等。AlbuPure&reg;層析填料 AlbuPure&reg;是Astrea Bioseparations和Albumedix公司合作開(kāi)發(fā)的白蛋白親和層析填料，填料基架是粒徑均一的高交聯(lián)瓊脂糖，配基是合成的三嗪化合物，具體高流速、高動(dòng)態(tài)結(jié)合載量、強(qiáng)化學(xué)耐受性等特點(diǎn)，主要用于白蛋白融合蛋白的純化。AlbuPure&reg;的性能參數(shù)如下表所示。 AlbuPure&reg;具有卓越的白蛋白融合蛋白結(jié)合性能，如圖4所示，研究人員在不同pH值不同流速的上樣條件下，探究了AlbuPure&reg;對(duì)scFv-rHSA的動(dòng)態(tài)結(jié)合載量，結(jié)果表明，在pH=4.5，240cm/h線(xiàn)性流速下，AlbuPure&reg;對(duì)目標(biāo)融合蛋白的動(dòng)態(tài)結(jié)合載量最佳，10%流穿時(shí)，載量高達(dá)38.4mg/mL。 圖4. AlbuPure&reg;動(dòng)態(tài)結(jié)合載量研究與Mimetic Blue&reg; SA HL P6XL類(lèi)似，AlbuPure&reg;親和層析填料也具有優(yōu)秀的化學(xué)穩(wěn)定性，可耐受1M NaOH溶液的清潔，對(duì)常見(jiàn)的變性劑、表面活性劑、還原劑等兼容性良好。 在一項(xiàng)研究測(cè)試中，研究人員使用酵母體系表達(dá)Anti-HIV gp41-rHSA融合蛋白（72kDa），收獲液經(jīng)澄清后，上樣到裝有AlbuPure&reg;的層析柱中，層析工藝參數(shù)如下表所示： 由圖5的層析圖譜和圖6的SDS-PAGE檢測(cè)結(jié)果可知，AlbuPure&reg;可以高效捕獲Anti-HIV gp41-rHSA融合蛋白，雜質(zhì)蛋白在上樣時(shí)流穿，經(jīng)過(guò)三次不同pH值下的淋洗步驟，可進(jìn)一步去除少量掛柱的雜質(zhì)蛋白，目標(biāo)融合蛋白最后由辛酸鈉洗脫下柱，純度極高。 圖5. AlbuPure&reg;純化Anti-HIV gp41-rHSA融合蛋白的層析圖譜圖6. SDS-PAGE檢測(cè)結(jié)果 Lane: 1. Load (diluted); Lane 2: FT (neat); Lane 3: post load wash (neat); Lane 4: wash 1 (neat); Lane 5: wash 2 (neat); Lane 6: wash 3 (neat); Lane 7: elution (diluted); Lane 8: elution (10 fold dilution of lane 7); Lane 9: human albumin standard (1µg)AlbuPure&reg;訂購(gòu)信息 散裝填料 預(yù)裝柱 如您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣，歡迎點(diǎn)擊這里填寫(xiě)信息，Astrea Bioseparations技術(shù)專(zhuān)家將為您提供個(gè)性化優(yōu)化方案，切實(shí)幫您解決純化工藝中的疑難問(wèn)題。 Astrea Bioseparations于1987年孵化自劍橋大學(xué)，擁有超過(guò)30年層析介質(zhì)研發(fā)和生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)，是世界級(jí)層析介質(zhì)產(chǎn)品與服務(wù)供應(yīng)商。目前使用Astrea的產(chǎn)品已有超過(guò)21個(gè)生產(chǎn)工藝通過(guò)了FDA和EMA的批準(zhǔn)。Astrea Bioseparations在全球擁有3個(gè)研發(fā)和生產(chǎn)基地，專(zhuān)注為生物大分子和CGT領(lǐng)域提供行業(yè)領(lǐng)先的層析介質(zhì)和技術(shù)服務(wù)。Astrea Bioseparations推出的基于納米纖維的新型層析技術(shù)，解決了傳統(tǒng)生物分離工具載量低和工藝耗時(shí)問(wèn)題，實(shí)現(xiàn)更快、更環(huán)保、更具成本效益的純化過(guò)程，完全符合當(dāng)今生物治療創(chuàng)新的需求。 西美杰是Astrea Bioseparations中國(guó)區(qū)代理，為用戶(hù)提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎隨時(shí)撥打西美杰客服熱線(xiàn)400-050-4006或登錄網(wǎng)站wap.cijlm.cn了解更多信息。參考文獻(xiàn) 1. 血清白蛋白的生物學(xué)特性研究進(jìn)展，生命科學(xué)，第25卷，第10期，2013年10月 2.人血清白蛋白純化技術(shù)研究進(jìn)展，生物工程學(xué)報(bào)，18卷6期，2002年11月 3. 人血清白蛋白融合技術(shù)在藥物長(zhǎng)效化改造中的應(yīng)用，生命科學(xué)，第27卷，第9期，2015年9月 4. R. Raoufinia et al., Overview of Albumin and Its Purification Methods, 2016 5. M. Sanches et al., AlbuCORE: an albumin-based molecular scaffold for multivalent biologics design, 2020 6. Technical User Guide: Mimetic Blue&reg; SA HL P6XL, Astrea Bioseparations 7. Application Note: Capture and purification of human serum albumin from human source plasma using Mimetic Blue&reg; SA HL P6XL, Astrea Bioseparations 8. Technical User Guide: AlbuPure&reg;, Astrea Bioseparations 9. Technical Note: Capture and purification of recombinant albumin-fusion proteins using AlbuPure&reg;, Astrea Bioseparations 更多>

HCPure?多模式層析填料，助力生物制品的高效純化

近年來(lái)，生物制藥行業(yè)呈現(xiàn)出繁榮發(fā)展的趨勢(shì)，很多大分子生物制品已經(jīng)過(guò)監(jiān)管部門(mén)批準(zhǔn)上市，另有不少創(chuàng)新型大分子正處于臨床后期或上市前申報(bào)階段，即將為患者帶來(lái)福音。例如，基于CHO細(xì)胞表達(dá)的單克隆抗體、基于大腸桿菌（E.coli）體系表達(dá)的重組蛋白或納米抗體、基于HEK293細(xì)胞或昆蟲(chóng)細(xì)胞SF9表達(dá)的腺相關(guān)病毒（AAV）、基于酵母細(xì)胞表達(dá)的病毒樣顆粒（VLP）等。不同于傳統(tǒng)的小分子化學(xué)藥，生物大分子的表達(dá)體系更為復(fù)雜，雜質(zhì)種類(lèi)更多（如宿主蛋白（HCP）和宿主DNA殘留(HCD)等），雜質(zhì)結(jié)構(gòu)相對(duì)復(fù)雜，這給下游純化帶來(lái)了極大的挑戰(zhàn)。 基于傳統(tǒng)微球技術(shù)的層析工藝是生物大分子純化的重要手段，其具有工藝性能穩(wěn)定、放大性良好等優(yōu)點(diǎn)。近年來(lái)，多模式層析填料受到越來(lái)越多的關(guān)注。多模式層析填料往往具備至少兩種相互作用機(jī)制，其中最常見(jiàn)的是將離子交換模式與疏水相互作用模式結(jié)合，可以在廣泛的pH和電導(dǎo)率范圍內(nèi)有效純化目標(biāo)分子。圖1. HCPureTM配基結(jié)構(gòu)和作用方式 HCPureTM是英國(guó)Astrea Bioseparations公司2023年推出的多模式層析填料，填料基架為粒徑均一的高交聯(lián)瓊脂糖，基架上修飾有化學(xué)合成的小分子配基（圖1），主要以疏水相互作用的方式結(jié)合料液中的雜質(zhì)，同時(shí)兼具氫鍵相互作用模式（與市售主流產(chǎn)品作用原理不同，形成互補(bǔ)），適用于多種表達(dá)體系，在廣泛的上樣條件下，能穩(wěn)健的去除料液中的HCP（宿主細(xì)胞蛋白）、HCD（宿主細(xì)胞DNA）、聚集體、分子片段等工藝或產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)。表1展示了HCPureTM在常見(jiàn)的表達(dá)體系中雜質(zhì)去除能力。表1. HCPureTM在多種表達(dá)體系中的應(yīng)用效果 1. HCPureTM在大腸桿菌（E. coli ）表達(dá)體系中可以有效去除HCP在該應(yīng)用案例中，研究人員使用大腸桿菌（E. coli ）表達(dá)納米抗體Vκ，收獲液先經(jīng)過(guò)Protein L親和層析純化，洗脫液經(jīng)中和后調(diào)節(jié)成不同的pH（6.0-8.0）和電導(dǎo)率（6-18mS/cm），隨后以流穿模式上樣HCPureTM，收集流穿液和淋洗液，檢測(cè)Vκ和HCP的含量，以探究HCPureTM的最佳上樣條件。測(cè)試條件如下表所示： 圖2. E.coli表達(dá)體系中HCPureTM上樣pH和電導(dǎo)率的探究 由圖2的檢測(cè)結(jié)果可知，在較低的pH（6.0）和較低的電導(dǎo)率（6ms/cm）上樣條件下，HCP的去除效果最佳，同時(shí)目標(biāo)分子Vκ的回收率最高。在最優(yōu)上樣條件下，料液中的HCP可以從30000ppm降至200ppm（2個(gè)log值的去除能力），Vκ回收率大于85%（表2）。表2. HCPureTM在E. coli 表達(dá)體系中可以有效去除HCP 2. HCPureTM在CHO細(xì)胞表達(dá)體系中可以有效去除HCP在該應(yīng)用案例中，研究人員使用CHO細(xì)胞表達(dá)IgG型單克隆抗體，澄清后的收獲液先經(jīng)過(guò)Protein A親和層析純化，洗脫液經(jīng)中和后調(diào)節(jié)成不同的pH（4.0-9.0）和電導(dǎo)率（8-18ms/cm），再以流穿模式上樣到HCPureTM中，收集流穿液和淋洗液，檢測(cè)IgG和HCP含量，其中，pH 6.0、電導(dǎo)率12ms/cm是未經(jīng)調(diào)節(jié)的親和層析洗脫中和液。表3. CHO細(xì)胞體系中，不同上樣pH和電導(dǎo)率條件下，HCPureTM均可有效去除HCP 由表3的檢測(cè)結(jié)果可知，在廣泛的上樣pH和電導(dǎo)率范圍內(nèi)，HCPureTM均可有效的去除上樣料液中的HCP（平均84%），同時(shí)保持目標(biāo)分子的高回收率（平均87%）。此外，由于pH 6.0、電導(dǎo)率12mS/cm是初始的親和層析洗脫中和液，因此，親和層析后，料液可不經(jīng)過(guò)調(diào)整或緩沖液置換，直接上樣到HCPureTM中，同樣保持優(yōu)秀的回收率和HCP去除效果，且大大節(jié)約了工藝時(shí)間和成本。 3. HCPureTM在CHO細(xì)胞表達(dá)體系中可以有效去除聚集體在該應(yīng)用案例中，研究人員使用CHO細(xì)胞表達(dá)IgG型單克隆抗體，料液經(jīng)過(guò)Protein A親和層析和陽(yáng)離子交換層析純化后，在較低的pH和較高的電導(dǎo)率條件下孵育，誘導(dǎo)產(chǎn)生高含量的聚集體，再以流穿模式上樣HCPureTM，收集流穿液和淋洗液，檢測(cè)聚集體含量。表4. HCPureTM可顯著去除抗體料液中的聚集體 由檢測(cè)結(jié)果（表4）可看出，料液經(jīng)過(guò)HCPureTM純化后，聚集體由初始的6.7%降低到2.9%，HCPureTM可顯著去除料液中的聚集體。 4. HCPureTM在HEK 293細(xì)胞表達(dá)體系中可以有效去除HCP在該應(yīng)用案例中，研究人員使用HEK293細(xì)胞以瞬轉(zhuǎn)的方式表達(dá)2型腺相關(guān)病毒（AAV-2），病毒載體經(jīng)過(guò)親和層析純化后，仍含有較高含量的低分子蛋白雜質(zhì)，將親和層析洗脫液置換到PBS+200mM NaCl（pH 7.5）中，以流穿模式上樣到HCPureTM（10mm內(nèi)徑層析柱，柱高10cm），總上樣量為5.0E+13VP，收集流穿液和淋洗液進(jìn)行分析。圖3. SDS-PAGE檢測(cè)結(jié)果 表5. ELISA檢測(cè)結(jié)果 由SDS-PAGE結(jié)果（圖3）可看出，流穿液中包含大部分病毒衣殼蛋白VP1，VP2和VP3條帶（8-13泳道），而再生液（14泳道）中則包含大量的低分子蛋白雜質(zhì)條帶，表明HCPureTM可以有效去除料液中的蛋白雜質(zhì)分子。由ELISA檢測(cè)結(jié)果（表5）可知，流穿液中的病毒衣殼蛋白幾乎全部回收（接近100%），表明HCPureTM在去除蛋白雜質(zhì)的同時(shí)可以保持優(yōu)秀的AAV回收率。 HCPureTM多模式層析填料技術(shù)參數(shù) HCPureTM多模式層析填料產(chǎn)品信息散裝填料 預(yù)裝柱 如您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣，歡迎點(diǎn)擊這里填寫(xiě)信息，Astrea Bioseparations技術(shù)專(zhuān)家將為您提供個(gè)性化優(yōu)化方案，切實(shí)幫您解決純化工藝中的疑難問(wèn)題。 Astrea Bioseparations于1987年孵化自劍橋大學(xué)，擁有超過(guò)30年層析介質(zhì)研發(fā)和生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)，是世界級(jí)層析介質(zhì)產(chǎn)品與服務(wù)供應(yīng)商。目前使用Astrea的產(chǎn)品已有超過(guò)21個(gè)生產(chǎn)工藝通過(guò)了FDA和EMA的批準(zhǔn)。Astrea Bioseparations在全球擁有3個(gè)研發(fā)和生產(chǎn)基地，專(zhuān)注為生物大分子和CGT領(lǐng)域提供行業(yè)領(lǐng)先的層析介質(zhì)和技術(shù)服務(wù)。Astrea Bioseparations推出的基于納米纖維的新型層析技術(shù)，解決了傳統(tǒng)生物分離工具載量低和工藝耗時(shí)問(wèn)題，實(shí)現(xiàn)更快、更環(huán)保、更具成本效益的純化過(guò)程，完全符合當(dāng)今生物治療創(chuàng)新的需求。 西美杰是Astrea Bioseparations中國(guó)區(qū)代理，為用戶(hù)提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎隨時(shí)撥打西美杰客服熱線(xiàn)400-050-4006或登錄網(wǎng)站wap.cijlm.cn了解更多信息。 參考文獻(xiàn)：J. Kreusser et al., Influence of pH value and salts on the adsorption of lysozyme in mixed-mode chromatography, 2021R. Hess et al., Standardized method for mechanistic modeling of multimodal anion exchange chromatography in flow through operation, 2023 Technical Note: HCPURE?: A FIT FOR PURPOSE HOST CELL PROTEIN CLEARANCE SOLUTION IN E. COLI WORKFLOWS, Astrea BioseparationsTechnical Note: HCPure? host cell protein clearance resin: Mixed mode chromatography as a means of process intensification, Astrea BioseparationsTechnical Note: HCPure? host cell protein clearance resin: Mixed mode chromatography as a means of process intensification, Astrea BioseparationsTechnical Note: HCPURE?: HOST CELL IMPURITY REMOVAL IN CHO WORKFLOWS, Astrea BioseparationsTechnical User Guide: HCPureTM, Astrea Bioseparations 更多>

新品上市 | 耐高鹽全能核酸酶DENARASE? High Salt

DENARASE&reg; High Salt 是一種經(jīng)過(guò)生物工程改造的野生型 Serratia marcescens 內(nèi)切酶，通常用于生物工藝中的 DNA 去除。與野生型 DENARASE&reg; 相比，該酶的幾個(gè)氨基酸被替換以提高其耐鹽性，而不會(huì)失去其對(duì)核酸的特異性。DENARASE&reg; High Salt 在更廣泛的鹽濃度和 pH 范圍內(nèi)保持更高的活性，為客戶(hù)提供了更大的工藝靈活性，同時(shí)為病毒載體制造工藝提升成本效益，尤其是在需要較高鹽濃度的條件下。由于與野生型核酸內(nèi)切酶具有很高的相似性，DENARASE&reg; High Salt 可以使用與野生型酶相同的核酸內(nèi)切酶 ELISA試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，例如DENARASE&reg; ELISA試劑盒，Cygnus核酸內(nèi)切酶殘留檢測(cè)試劑盒（EonucleaseGTP ELISA，貨號(hào)F960）。 DENARASE&reg; High Salt的生產(chǎn)采用c-LEcta成熟的專(zhuān)利DENARASE&reg;生產(chǎn)工藝，該工藝采用革蘭氏陽(yáng)性芽孢桿菌菌株（Bacillus.sp.）表達(dá)，大大降低了內(nèi)毒素殘留風(fēng)險(xiǎn)。該酶按照ISO 9001標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)，不使用抗生素和動(dòng)物源性原料或TSE/BSE風(fēng)險(xiǎn)原料。 DENARASE&reg; High Salt酶特性 DENARASE&reg; High Salt是專(zhuān)為在更高、與工藝相關(guān)的鹽濃度下實(shí)現(xiàn)DNA清除活性而設(shè)計(jì)的。該工程酶在0-500 mM一價(jià)陽(yáng)離子濃度范圍內(nèi)具有活性（見(jiàn)圖1）。 圖1. NaCl對(duì)酶活性影響 鎂離子（Mg2+）是確保DENARASE&reg; High Salt發(fā)揮酶活性所必需的輔因子。DENARASE&reg; High Salt在低鎂離子濃度（5-25 mM Mg2+）下具有基本活性，但在高鎂離子濃度（>25 mM Mg2+）下酶活性會(huì)降低。因此，在使用DENARASE&reg; High Salt時(shí)，應(yīng)確保鎂離子濃度在適當(dāng)范圍內(nèi)（見(jiàn)圖2）。 圖2. Mg2+對(duì)酶活性影響 DENARASE&reg; High Salt質(zhì)量參數(shù) DENARASE&reg; High Salt產(chǎn)品為液體形式，配方為20 mM Tris-HCl（pH 7.4±0.2）、250 mM NaCl、5 mM MgCl2和50%（體積比）甘油。 項(xiàng)目 方法 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 產(chǎn)品性狀 直接觀(guān)測(cè) 澄清透明液體 酶活性 光學(xué)測(cè)定1 >250 U/µL 純度 SDS-PAGE和銀染 ≥ 99% 比活性 光學(xué)測(cè)定單位蛋白具有的酶活性即280 nm下44,600 L x mol-1 x cm-1的摩爾消光系數(shù) >5 x 105 U/mg 內(nèi)毒素 LAL-Test，參考 Ph. Eur. 2.6.14, 方法C <0.25 EU/kU 總菌落數(shù) TAMC/TYMC 參照 Ph. Eur. 2.6.12 需氧菌: < 5 cfu/200 µL 酵母: < 5 cfu/200 µL 1. Unit定義: 每個(gè)活性單位 (U) 是指在37 °C ，pH 8.0 條件下，在30分鐘內(nèi)將鮭魚(yú)精DNA消化至相當(dāng)于ΔA260nm值為1.0 的酸溶性寡聚核苷酸。 DENARASE&reg; High Salt產(chǎn)品參數(shù) 分子量： 27 kDa 最適pH： pH 7.4 - 9.0 最適反應(yīng)溫度：37 °C 等電點(diǎn)(pI)：7.831 輔因子：Mg2+ DENARASE&reg; High Salt訂購(gòu)信息 品名 貨號(hào) 規(guī)格 DENARASE High Salt 25 kU 22002-25k 25 kU DENARASE High Salt 100 kU 22002-100k 100 kU DENARASE High Salt 500 kU 22002-500k 500 kU DENARASE High Salt 1000 kU 22002-1000k 1000 kU DENARASE High Salt 5000 kU 22002-5000k 5000 kU 關(guān)注西美杰微信公眾號(hào)（微信號(hào)：xmjsci），回復(fù)“核酸酶試用”，填寫(xiě)表單即可申請(qǐng)c-LEcta DENARASE&reg; High Salt免費(fèi)試用機(jī)會(huì)，數(shù)量有限，先到先得！ 如需了解更多信息，歡迎致電c-LEcta中國(guó)區(qū)代理北京西美杰客服熱線(xiàn)400-050-4006或登錄網(wǎng)站wap.cijlm.cn獲取更多資料。 更多>

星品推薦 | Agrisera植物通用抗體（Global antibodies）

通用抗體（Global antibodies）是Agrisera公司針對(duì)植物蛋白中保守的氨基酸序列設(shè)計(jì)的一系列抗體。這些抗體的顯著優(yōu)勢(shì)在于它們能夠跨不同物種準(zhǔn)確識(shí)別目的蛋白，并且可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)品實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白的精確定量分析，這些抗體具備廣泛的適用性，能夠檢測(cè)包括高等植物、苔蘚、藻類(lèi)以及硅藻在內(nèi)的多物種中的相同蛋白。無(wú)論是在標(biāo)準(zhǔn)品還是待測(cè)樣本中，這些抗體都能一致識(shí)別特定蛋白區(qū)域，從而確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的高可靠性和準(zhǔn)確性，為研究人員提供極為方便的選擇。通用抗體的應(yīng)用 ? 從一系列來(lái)源，包括藍(lán)藻，浮游植物或未表征的植物中檢測(cè)目的蛋白 ? 從不同光合水平來(lái)源的浮游植物群落的光合蛋白混合樣本中檢測(cè)環(huán)境適應(yīng)性 ? 預(yù)測(cè)群落中主要光合作用和生物合成過(guò)程的最大能力 Agrisera部分通用抗體產(chǎn)品 產(chǎn)品名稱(chēng) 貨號(hào) 實(shí)驗(yàn)類(lèi)型 AOX1/2 | Plant alternative oxidase 1and 2 AS04 054 IL,WB AtpB | Beta subunit of ATP synthase AS05 085-10 IF,WB Cat | Catalase (peroxisomal marker) AS09 501 IL,IG,IP,WB FtsZ2 | Plant cell division proteinftsZ2 AS13 2651 WB GLN1 GLN2 | GS1 GS2 glutaminesynthetase global antibody AS08 295 WB GlnA | Glutamine synthetase AS01 018 WB GOGAT | Glutamine oxoglutarateaminotransferase AS07 242 WB H+ATPase | Plasma membrane H+ATPase AS07 260 IF,IL,WB HSP70 | Heat shock protein 70 AS08 371 IP, WB NifH | Nitrogenase iron protein AS01 021A IF,IHC,WB PEPC | Phosphoenolpyruvatecarboxylase AS09 458 IL,WB PetC | Rieske iron-sulfur protein of Cyt b6/fcomplex AS08 330 BN-PAGE,WB PsaB | PSI-B core subunit ofphotosystem I AS10 695 BN-PAGE,WB PsbA | D1 protein of PSII,C-terminal(thylakoid membrane marker) AS05 084 IF,IG,WB RbcL | Rubisco large subunit AS03 037 IF,IG, TP, WB PsaC | PSI-C core subunit ofphotosystem I AS10 939 WB SPS | Sucrose phosphate synthase,global AS03 035A WB 如需了解更多Agrisera通用抗體請(qǐng)點(diǎn)擊這里。 部分應(yīng)用案例展示 RbcL | Rubisco large subunit, form I (rabbit)，AS03 037 GlnA | Glutamine synthetase，AS01 018 HSP70 | Heat shock protein 70 (cytoplasmic)，AS08 371 西美杰代理的瑞典Agrisera公司自1980年成立以來(lái)，一直專(zhuān)注于開(kāi)發(fā)高質(zhì)量的植物單克隆和多克隆抗體，并以其卓越的研發(fā)實(shí)力和生產(chǎn)技術(shù)，在全球植物抗體領(lǐng)域占據(jù)著領(lǐng)導(dǎo)地位。其產(chǎn)品線(xiàn)覆蓋了廣泛的物種范圍，在A(yíng)grisera的產(chǎn)品目錄中包含了眾多模式植物和重要農(nóng)作物，如擬南芥、水稻、小麥、玉米和番茄等超過(guò)三十種植物，滿(mǎn)足各類(lèi)植物學(xué)研究需求的廣泛抗體庫(kù)。有眾多已發(fā)表文獻(xiàn)支持，確保研究結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。北京西美杰科技有限公司是Agrisera品牌中國(guó)區(qū)代理，致力于為國(guó)內(nèi)廣大科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的免疫學(xué)產(chǎn)品和服務(wù)。如果您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣，歡迎致電西美杰全國(guó)客服熱線(xiàn)400-050-4006或登錄官方網(wǎng)站wap.cijlm.cn了解更多信息。參考文獻(xiàn)： Analyzing photosynthetic complexes in uncharacterized species or mixed microalgal communities using global antibodies. Physiologia Plantarum, 2003: 119:322-327. 更多>

Pfanstiehl 喜獲第15個(gè)CDE登記號(hào)- 氨丁三醇Tris Base

“ 熱烈祝賀Pfanstiehl 2023年推出的新品氨丁三醇Tris Base喜獲CDE登記號(hào)F20240000172. 這是Pfanstiehl產(chǎn)品獲得的第15個(gè)CDE登記號(hào)！”Tris Base是一種應(yīng)用非常廣泛的有機(jī)試劑。它及其衍生物被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的緩沖液的制備，可用于藥物生產(chǎn)、有機(jī)合成、生物緩沖劑等。Moderna新冠疫苗處方的披露顯示出Tris可作為極佳的mRNA-LNP復(fù)合體緩沖液，引起大家對(duì)Tris作為蛋白或核酸類(lèi)藥物緩沖體系的關(guān)注和興趣。Pfanstiehl秉承一貫高品質(zhì)理念，于2023年11月重磅推出的注射級(jí)別Tris Base T-153, 具有高純度，超低內(nèi)毒素，超低金屬雜質(zhì)殘留的特點(diǎn)，并且新增DNA，RNA，DNA酶，RNA酶和脂肪酶等多項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)的檢測(cè)，符合多國(guó)藥典規(guī)定（USP, EP, BP, ChP），可用于生物治療性藥物和疫苗的生產(chǎn)。產(chǎn)品信息： · 產(chǎn)品名稱(chēng): Tris Base, High Purity, Low Endotoxin, Low Metals· 中文名稱(chēng)：三羥甲基氨基甲烷· 分子式：C4H11NO3· 分子量：121.14g/mol· CAS號(hào)：77-86-1· 產(chǎn)品貨號(hào)：T-153產(chǎn)品特點(diǎn)：· 高純度，超低內(nèi)毒素，超低微生物含量，超低金屬雜質(zhì)殘留· 質(zhì)量指標(biāo)新增DNA，RNA，DNA酶，RNA酶，脂肪酶的檢測(cè)· 符合多國(guó)藥典：USP, EP, BP, ChP· 符合ICH Q3D標(biāo)準(zhǔn)DNA· 符合GMP標(biāo)準(zhǔn)· CDE登記號(hào)：F20240000172產(chǎn)品應(yīng)用：· 緩沖液Pfanstiehl Inc.全產(chǎn)品系列如下，歡迎聯(lián)系Pfanstiehl中國(guó)區(qū)代理北京西美杰科技有限公司獲取100g裝免費(fèi)樣品。北京西美杰科技有限公司為Pfanstiehl中國(guó)代理，為客戶(hù)提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎撥打西美杰客服電話(huà)400-050-4006或者登陸網(wǎng)站wap.cijlm.cn了解更多信息。 更多>

蛋白結(jié)晶研究入門(mén)全攻略：輕松開(kāi)啟生命科學(xué)探索之旅

蛋白質(zhì)結(jié)晶是研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)鍵手段，對(duì)理解生物大分子作用、疾病機(jī)制及藥物開(kāi)發(fā)至關(guān)重要。它涉及蛋白質(zhì)分子在溶液中規(guī)則堆積形成有序晶體的過(guò)程，受蛋白質(zhì)純度、濃度、緩沖液成分等多種因素影響。為獲高質(zhì)量晶體，需進(jìn)行樣品制備、條件篩選與優(yōu)化等。蛋白結(jié)晶研究推動(dòng)生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域發(fā)展，支持藥物設(shè)計(jì)和蛋白質(zhì)工程。本文概述了蛋白質(zhì)結(jié)晶的制備、方法、篩選、優(yōu)化等要點(diǎn)，為相關(guān)研究提供參考。 一 蛋白質(zhì)晶體的發(fā)展史 蛋白質(zhì)晶體的研究始于19世紀(jì)中期，Hunefeld首先報(bào)道了血紅蛋白晶體。到了20世紀(jì)，結(jié)晶技術(shù)成為提純和研究蛋白質(zhì)的重要方法，特別是John Jacob Abel對(duì)胰島素的結(jié)晶，以及James B. Sumner對(duì)酶作為晶體蛋白質(zhì)的確認(rèn)。1930年代末，蛋白質(zhì)晶體開(kāi)始用X射線(xiàn)分析，開(kāi)啟了結(jié)構(gòu)生物學(xué)的新篇章。隨著遺傳學(xué)和分子生物學(xué)的發(fā)展，特別是DNA技術(shù)的應(yīng)用，蛋白質(zhì)晶體的研究在1980年代后得到了極大的加速和變革。 二 蛋白結(jié)晶：藝術(shù)與科學(xué)的結(jié)合 盡管現(xiàn)代分子生物學(xué)和晶體學(xué)的進(jìn)步為許多實(shí)驗(yàn)提供了便捷，但蛋白質(zhì)結(jié)晶仍然是一個(gè)既簡(jiǎn)單又復(fù)雜的挑戰(zhàn)。這一過(guò)程結(jié)合了科學(xué)的方法與藝術(shù)般的直覺(jué)和創(chuàng)造力，然而又高度依賴(lài)經(jīng)驗(yàn)的積累。 由于生物大分子（如蛋白質(zhì)）由大量不同原子以復(fù)雜方式組合，結(jié)晶過(guò)程中存在諸多變量和影響因素。這些因素包括蛋白質(zhì)純度、濃度、pH值、離子強(qiáng)度等，每一個(gè)變量都可能對(duì)結(jié)晶結(jié)果產(chǎn)生顯著影響（表1和2）。 表1. 影響蛋白質(zhì)晶體生長(zhǎng)的化學(xué)變量 樣品的純度 基因修飾 樣品的構(gòu)象靈活性 分子的對(duì)稱(chēng)性 樣品的均一性 樣品的穩(wěn)定性和變性程度 PH值和緩沖液 等電點(diǎn) 沉淀劑的類(lèi)型和濃度 存在his標(biāo)簽和其他純化標(biāo)簽與否 樣品的濃度 熱穩(wěn)定性 添加劑、輔助因子、配體、抑制劑、效應(yīng)劑和輔料 PH穩(wěn)定性 混沌劑，如尿素、鹽酸胍、硫酸銨等 樣本的獲取、處理、保存等歷史過(guò)程 洗滌劑 蛋白水解 金屬離子 微生物污染 離子強(qiáng)度 樣品保存 還原劑或氧化劑 樣品處理及相關(guān)的清潔度 樣品是來(lái)源 陰、陽(yáng)離子類(lèi)型及濃度 無(wú)定形顆粒物質(zhì) 相對(duì)過(guò)飽和度 翻譯后修飾 其他試劑的初始濃度和最終濃度 化學(xué)修飾 平衡的路徑和速率 表2.可能或確實(shí)影響蛋白質(zhì)晶體生長(zhǎng)的物理變量 溫度 電磁場(chǎng) 平衡速率 結(jié)晶裝置的表面 結(jié)晶方法 試劑的粘度 重力、對(duì)流和沉降 異質(zhì)和外延成核劑 振動(dòng)和聲音 結(jié)晶裝置的幾何形狀 樣品和試劑的體積 時(shí)間 壓力 試劑的介電性能 結(jié)晶實(shí)驗(yàn)通常從篩選開(kāi)始，旨在找到能產(chǎn)生晶體的關(guān)鍵變量組合。然而，為了獲得具有特定特性的晶體（如用于結(jié)構(gòu)生物學(xué)、純化或生物治療研究），往往需要進(jìn)一步的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)（表3和表4）。 表3.結(jié)晶方法-過(guò)飽和度的實(shí)現(xiàn) 氣相擴(kuò)散法(Sitting, Hanging, Sandwich) 序列提?。〝?shù)據(jù)處理和分析技術(shù)） 分批結(jié)晶法(微分批結(jié)晶) pH誘導(dǎo)（簡(jiǎn)單、可控） 透析技術(shù) (微透析技術(shù)發(fā)揮輔助作用) 溫度誘導(dǎo)（操作簡(jiǎn)便、成本較低，需與其他方法結(jié)合使用） 自由界面擴(kuò)散(逆擴(kuò)散, 液橋) 效應(yīng)物添加(也加Silver Bullet) 控制蒸發(fā) 表4.蛋白質(zhì)結(jié)晶所用試劑 鹽類(lèi) (硫酸銨、甲酸鈉、磷酸銨等) 非揮發(fā)性有機(jī)物((±)-2-甲基-2,4-戊二醇、1,6-己二醇、甘油等) 聚合物 (聚乙二醇、分子量范圍在200到20,000之間、乙烯亞胺、杰凡尼&reg;等) 緩沖液 (HEPES、Tris、醋酸鈉、MES等) 揮發(fā)性有機(jī)物 (2-丙醇、1,4-二氧六環(huán)、乙醇等) 添加劑 (氯化鈣、氯化鈉、三(2-羧乙基)膦、n-辛基-β-D-葡糖苷等) 盡管現(xiàn)代技術(shù)提供了豐富的資源和工具，但結(jié)晶并非僅僅是使用這些工具那么簡(jiǎn)單。成功的結(jié)晶策略需要基于一些基本原則，正如Alex McPherson等結(jié)晶領(lǐng)域的先驅(qū)所提出的，在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)之前，考慮這些原則將為您的結(jié)晶工作提供堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。 三 蛋白結(jié)晶的關(guān)鍵要素 樣本：樣本的純度是結(jié)晶成功的基石，需細(xì)致處理以保證樣本高均一性。 均一性：蛋白質(zhì)樣品的化學(xué)結(jié)構(gòu)和分子量的一致性對(duì)形成有序晶體至關(guān)重要。 溶解度：優(yōu)化樣本在緩沖液中的溶解條件，追求單分散性，避免聚集和沉淀。 穩(wěn)定性：確保蛋白質(zhì)在結(jié)晶過(guò)程中保持結(jié)構(gòu)和功能穩(wěn)定，避免變性。 超飽和：通過(guò)控制超飽和度，誘導(dǎo)蛋白質(zhì)分子有序排列形成晶核。 締合：調(diào)控蛋白質(zhì)分子間的有序相互作用，促進(jìn)有序聚集，避免非特異性聚集。 成核：控制溶液中蛋白質(zhì)初始結(jié)晶核的形成，以?xún)?yōu)化晶體數(shù)量、大小和質(zhì)量。 多樣性：嘗試多種方法和條件來(lái)發(fā)現(xiàn)適合特定蛋白質(zhì)的結(jié)晶條件。 控制：精確調(diào)控實(shí)驗(yàn)條件和過(guò)程，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。 雜質(zhì)：保持樣品純度，減少雜質(zhì)對(duì)結(jié)晶和后續(xù)研究的干擾。 保存：妥善保護(hù)結(jié)晶出的蛋白質(zhì)晶體，防止其受到損害，確保后續(xù)研究的可靠性。 西美杰代理的美國(guó)Hampton Research公司是一家專(zhuān)注于蛋白質(zhì)晶體研究的領(lǐng)先生產(chǎn)商，其廣泛的產(chǎn)品組合涵蓋了從結(jié)晶初步篩選到結(jié)晶優(yōu)化篩選，再到定制單組分結(jié)晶試劑和結(jié)晶生長(zhǎng)優(yōu)化試劑等全方位產(chǎn)品。這些產(chǎn)品能夠滿(mǎn)足不同蛋白結(jié)晶研究的需求，包括普通蛋白、膜蛋白以及蛋白復(fù)合體的結(jié)晶。 西美杰代理的Hampton Research以其尖端的生物大分子結(jié)晶技術(shù)和實(shí)用豐富的產(chǎn)品線(xiàn)，為全球晶體研究人員提供了全面的晶體研究試劑和實(shí)驗(yàn)耗材。這些產(chǎn)品不僅極大地提升了科研人員的工作效率，而且?guī)椭麄內(nèi)〉昧俗吭降目蒲谐晒?，Hampton Research已成為晶體研究領(lǐng)域備受信賴(lài)的品牌之一。西美杰Hampton Research蛋白結(jié)晶熱銷(xiāo)產(chǎn)品 Hampton Research蛋白結(jié)晶篩選試劑盒 品牌 貨號(hào) 品名 規(guī)格 簡(jiǎn)介 Hampton HR2-144 Index 10ml, tube format 蛋白質(zhì)、絡(luò)合物、多肽、核酸和水溶性小分子等多種試劑體系的經(jīng)典結(jié)晶條件初篩選試劑盒，包含96個(gè)條件 Hampton HR2-110 Crystal Screen 10 ml, tube format 蛋白、可溶性多肽、核酸和水溶性小分子等多種試劑體系結(jié)晶條件初篩試劑盒，包含50個(gè)條件 Hampton HR2-112 CrystalScreen 2 10ml, tube format 蛋白、可溶性多肽、核酸和水溶性小分子等多種試劑體系結(jié)晶條件初篩試劑盒，包含48個(gè)條件 Hampton HR2-114 MembFac 10 ml, tube format 適用于膜蛋白的結(jié)晶條件初篩試劑盒，包含48個(gè)條件 Hampton HR2-116 Natrix 10ml, tube format 核酸、核酸/蛋白質(zhì)復(fù)合物結(jié)晶條件初篩試劑盒，包含48個(gè)條件 Hampton HR2-117 Natrix 2 10 ml, tube format 核酸、核酸/蛋白質(zhì)復(fù)合物結(jié)晶條件初篩試劑盒，包含48個(gè)條件 Hampton HR2-082 PEGRx1 10ml, tube format 聚合物和pH條件初篩與二次篩選試劑盒，包含48個(gè)條件 Hampton HR2-084 PEGRx 2 10 ml, tube format 聚合物和pH條件初篩與二次篩選試劑盒，包含48個(gè)條件 Hampton HR2-126 PEG/IonScreen 10ml, tube format 聚合物、鹽和pH條件初篩與二次篩選試劑盒，包含48個(gè)條件 Hampton HR2-098 PEG/Ion 2 Screen 10 ml, tube format 聚合物、鹽和pH條件初篩與二次篩選試劑盒，包含48個(gè)條件 Hampton HR2-107 SaltRx1 10ml, tube format 鹽和pH條件初篩與二次篩選試劑盒，包含48個(gè)條件 Hampton HR2-109 SaltRx 2 10 ml, tube format 鹽和pH條件初篩與二次篩選試劑盒，包含48個(gè)條件 除上述產(chǎn)品外，西美杰還提供包括GRAS Screen?、Grid Screen系列、Low Ionic Strength Screen、XP Screen、JBScreen Wizard等等在內(nèi)的多種結(jié)晶條件篩選試劑盒，歡迎致電西美杰客服熱線(xiàn)400-050-4006咨詢(xún)訂購(gòu)。Hampton Research蛋白結(jié)晶優(yōu)化試劑盒 品牌 貨號(hào) 品名 規(guī)格 簡(jiǎn)介 Hampton HR2-072 Solubility& Stability Screen 0.5ml, Deep Well block format 溶解度和穩(wěn)定性篩選，包含96個(gè)條件 Hampton HR2-413 Solubility & StabilityScreen 2 0.5 ml, Deep Well blockformat 溶解度和穩(wěn)定性篩選，包含96個(gè)條件 Hampton HR2-070 SlicepH 0.5ml, Deep Well block format pH篩選試劑盒，包含96個(gè)條件 Hampton HR2-138 Additive Screen 1 ml, Deep Well blockformat 添加劑篩選試劑盒，包含96個(gè)條件 Hampton HR2-459 GRASAdditive 1ml, Deep Well block format GRAS添加劑篩選，包含96個(gè)條件 Hampton HR2-096 Silver Bullets 0.50 ml, Deep Well blockformat 添加劑篩選試劑盒，包含96個(gè)條件 Hampton HR2-407 DetergentScreen 0.25ml, Deep Well block format 洗滌劑篩選試劑盒，包含96個(gè)條件 Hampton HR2-214 Ionic Liquid Screen 0.5 ml, tube format 離子液體篩選試劑盒，包含24個(gè)條件 Hampton HR2-241 StockOptionspH 10ml, tube format 晶體生長(zhǎng)篩選試劑盒，包含45個(gè)條件 Hampton HR2-235 StockOptions Sodium Citrate 10 ml, tube format 晶體生長(zhǎng)篩選試劑盒，包含24個(gè)條件 Hampton HR2-239 StockOptionsSodium Cacodylate 10ml, tube format 晶體生長(zhǎng)篩選試劑盒，包含24個(gè)條件 Hampton HR2-243 StockOptions MES 10 ml, tube format 晶體生長(zhǎng)篩選試劑盒，包含20個(gè)條件 Hampton HR2-103 StockOptionsBis-Tris Propane 10ml, tube format 晶體生長(zhǎng)篩選試劑盒，包含33個(gè)條件 Hampton HR2-102 StockOptions HEPES 10 ml, tube format 晶體生長(zhǎng)篩選試劑盒，包含15個(gè)條件 Hampton HR2-227 StockOptionsPolymer 10ml, tube format 晶體生長(zhǎng)篩選試劑盒，包含23個(gè)條件 Hampton HR2-245 StockOptions Salt 10 ml, tube format 晶體生長(zhǎng)篩選試劑盒，包含49個(gè)條件 Hampton HR2-073 CryoPro 1ml, tube format 晶體冷凍保護(hù)劑篩選，包含48個(gè)條件 Hampton HR2-501 50% v/v Jeffamine&reg; M-600&reg; pH 7.0 200 ml 結(jié)晶級(jí)Jeffamine M-600用于結(jié)晶條件優(yōu)化 Hampton HR2-525 50%w/v Polyethylene glycol 1,500 200mL 結(jié)晶級(jí)PEG 1500用于結(jié)晶條件優(yōu)化 Hampton HR2-527 50% w/v Polyethylene glycol3,350 Monodisperse 200 mL 結(jié)晶級(jí)PEG 3350用于結(jié)晶條件優(yōu)化 Hampton HR2-529 50%w/v Polyethylene glycol 4,000 200mL 結(jié)晶級(jí)PEG 4000用于結(jié)晶條件優(yōu)化 以上試劑盒中的單組分條件可單獨(dú)訂購(gòu)。除上述試劑盒外，西美杰還提供包括Proti-Ace?、Silica Hydrogel Kit、Heavy Atom Screens、I3C Phasing Kit等多款結(jié)晶優(yōu)化篩選試劑盒及試劑，歡迎致電西美杰客服熱線(xiàn)400-050-4006咨詢(xún)訂購(gòu)。Hampton Research蛋白結(jié)晶耗材工具 品牌 貨號(hào) 品名 規(guī)格 簡(jiǎn)介 Hampton HR2-320 SeedBead Kit 24tubes with PTFE Seed Bead 晶種制備珠 Hampton HR3-105 MASTERBLOCK&reg; 96 Deep Wellpolypropylene plate 50 plate case 96孔深孔板 Hampton HR3-081 72Well Microbatch Plate, Greiner 654102 untreated,hydrophobic - 270 plate case 72孔油下結(jié)晶板 Hampton HR3-125 Swissci 3 Well MidiCrystallization Plate in UVP (40) 40 plate case 3微孔/96孔坐滴板 Hampton HR3-158 CryschemPlate 24plate case 24孔坐滴板 Hampton HR3-231 22 mm x 0.22 mm Siliconizedcircle cover slides 1.0 ounce pack (~120slides) 圓形硅化玻璃蓋玻片 Hampton HR3-233 22mm x 0.22 mm Siliconized circle cover slides 10.0ounce case (~1,200 slides) 圓形硅化玻璃蓋玻片 Hampton HR3-609 Crystal Clear Sealing Film 100 pack 結(jié)晶板封口膜 Hampton HR4-216 CrystalCrusher 5pack 晶體粉碎器 Hampton HR4-217 Crystal Probe 12 pack 一次性不銹鋼晶體針 Hampton HR4-733 CrystalCap withVial - 60 pack 晶體環(huán)底座 Hampton HR4-811 Micro-Tools Set each 晶體處理工具套裝，含8個(gè)不同形狀的晶體探針 除上述產(chǎn)品外，西美杰還提供各種規(guī)格結(jié)晶板、loop、微橋、密封膠，Pucks等工具耗材及整套工具箱，幫助研究人員更快更高效的開(kāi)展實(shí)驗(yàn)。歡迎致電西美杰客服熱線(xiàn)400-050-4006咨詢(xún)訂購(gòu)。 西美杰作為Hampton Research在中國(guó)的官方授權(quán)代理，致力于為用戶(hù)提供卓越的技術(shù)支持和周到的售后服務(wù)。西美杰始終秉持“We promise what we can do. We do what we have promised”的核心理念，為用戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。若您想了解更多產(chǎn)品信息，歡迎致電北京西美杰全國(guó)客服熱線(xiàn)400-050-4006或登錄官網(wǎng)wap.cijlm.cn進(jìn)行查詢(xún)和了解。 References and Readings 1.Der Chemismus in der tierescher Organization, Hunefeld, F 1. (1840)p.160.Leipzig University, Germany. 2.A brief h istory of protein crystal growth, MePherson, A. (1991). J. Cryst.Growth, 110,1-10. 3 über die Eiweisskorper verschiedenen Oelsamen, Ritthausen, H. (1880)Pfluegers Arch. 21,81-104. 4 The proteins of the Brazil nut, Osborne T.(1891). Am. Chem. J. 13,212-218. 5 Crystalline insulin., Abel, 」.J., Geiling, E. M. K., Roultier, O. A., Bell, F. M.&Wintersteiner, 0.(1927).]. Pharmacol. Exp. Ther. 31,65-85. 6 The Enzymes, Sumner, J.B.& Somers, G.F(1943). New York: Aca-demic Press. 7 Crystalline enzymes, Northrop, M., Kunitz, M. & Herriott, R. M. (1948)New York: Columbia University Press. 8 Present at the flood: How structural molecular biology came about,Dickerson,R.E.(2005).FASEB J.20,809-810. 9 Preparation and Analysis of Protein Crystals, McPherson, A.(1982)New York: lohn Wiley & Sons. 10.Current approaches to macromolecular crystallization. McPherson, A. (1990).Eur.Biochem.189,1-23. 11.Crystallization of Biological Macromolecules, McPherson, A.(1999)Cold Spring Harbor: Cold Spring Harbor Laboratory Press. 12Introduction to protein crystallization, McPherson, A. and Gavira, J.A.(2014) Acta Crystallographica F, Volume 70, Part 1, 2-20. 13.Some Words of Advice from an Old Hand, Alexander McPherson, pages1-9, in Protein Crystallization, Second Edition, Edited by Terese Berg-fors. International University Line, 2009. 更多>

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北京西美杰科技有限公司（Beijing XMJ Scientific Co.,Ltd，以下簡(jiǎn)稱(chēng)西美杰）于2006年成立，由留美歸國(guó)生物領(lǐng)域?qū)I(yè)人士創(chuàng)辦。西美杰堅(jiān)持自己的經(jīng)營(yíng)理念，勤奮踏實(shí)地整合全球產(chǎn)品資源與技術(shù)資源，為高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生產(chǎn)企業(yè)提供一站式產(chǎn)品服務(wù)方案，幫助科研及企業(yè)單位縮短科研時(shí)間... 更多>

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